• <ul id="eqqco"></ul>
  • <tfoot id="eqqco"></tfoot>
  • <ul id="eqqco"></ul>

    服務熱線

    15021010459
    技術文章
    當前位置:主頁 > 技術文章 > 原位雜交DNA探針的標記如何選擇購買,速來圍觀

    原位雜交DNA探針的標記如何選擇購買,速來圍觀

    更新時間:2020-12-17 點擊次數:2286

    介紹

            可變長度的核酸片段(DNA探針)能夠與互補的核酸鏈形成非共價、高度特異的雙鏈(稱為雜交)。當一個標簽附加到這樣一個雜交探針的檢測可以有效地服務于定義目標DNA序列標記DNA探針通常用于原位雜交實驗研究和臨床診斷特定染色體的DNA序列,以及潛在的畸變(突變。缺失和/或重復)被檢測到并定位在固定的組織和細胞內。

    原位DNA的可視化要么通過熒光讀數(熒光原位雜交(FISH)),要么通過顯色檢測(顯色原位雜交(CISH)),這依賴于酶促反應導致有顏色的底物沉淀。

     

    原位雜交中對DNA探針的標記通常是使用標記DNA聚合酶(=聚合酶鏈反應(PCR))或DNA酶I/ DNA聚合酶1的混合物(-NT)(表1)

     

    表1原位雜交DNA探針可通過Nick Translation或PCR酶標

     Nick TranslationPCR
           原則                                                                            DNA酶 I在dsDNA中引入隨機單鏈斷裂('nicks '),隨后由DNA聚合酶I填充,使用標記的dNTP作為其天然配對物的替代物                                                                              一段特定核酸片段的擴增(用特定引物或多段DNA進行PCR)利用Taq聚合酶摻入標記的dNTP取代其自然對應物的位點(用退化寡核苷酸引物進行PCR (dopo -PCR))
    模板線性化的dsDNA的pmol量線性化的dsDNa的fmol數量
    標記片段大小100–500 bp dsDNAup to 1500 bp
    擴增

     

    熒光dUTP & dCTP

    熒光dUTP和dCTP可用于酶促標記DNA探針一步完成。標記后的DNA探針可通過熒光顯微鏡或光譜直接顯示。組合標記,例如用不同或*的熒光團標記探針,允許同時顯示多個目標(多路復用)41熒光團的選擇取決于可用的激發源、濾光片組、應用(單色或多色成像)(表2)和所需的酶標技術(Nick Translation或PCR)(表3)。

    熒光團的光穩定性親水性都是決策時需要考慮的關鍵參數。例如,光穩定性提高的熒光團一般可以增加靈敏度,從而提高目標序列的檢測極限。然而,熒光團的親水性直接影響相應標記的dUTP和dCTP的基材性能用親水(如Cy3)或中度疏水染料(如德州紅)標記的dUTP和dCTP是PCR和Nick翻譯標記的理想選擇。相反,疏水熒光載體(如ATTO0647N)會導致DNA擴增的提前終止,很可能是由于染料-dve或染料-酶的相互作用,因此僅推薦用于Nick Translation。

     

    表2所選熒光染料的光譜特性。++:好,+:中等,-:poon請注意:呋酚的性能取決于呋酚的應用,呋酚是親水性和光穩定性之間的一種承諾,這分別決定了親水性和光穩定性的親水性和檢測靈敏度。

    表3酶合成的熒光dUTP和dCTP。n / a:不適用

     

    華雅思創現貨產品:

    品牌貨號名稱包裝規格
    JenaNU-803-XX-425-LATTO425-dUTP,1mM,5x10μL
    JenaNU-803-XX-488-LATTO488-dUTP,1mM,5x10μL
    JenaNU-803-XX-532-LATTO532-dUTP,1mM,5x10μL
    JenaNU-803-TXR-LTexasRed-dUTP,1mM,5x10μL

     

    2025 版權所有 © 重慶市華雅干細胞技術有限公司  備案號:渝ICP備14000349號-4 sitemap.xml 管理登陸 技術支持:化工儀器網

    地址:重慶市江北區金渝大道153號8棟20-14 傳真:023-63419626 郵件:sales@ys-bio.com

    重慶市華雅干細胞技術有限公司主要經營干細胞研究 干細胞治療產品 生物試劑 實驗耗材 藥物研發等產品。

    關注我們

    服務熱線

    400-021-2200

    掃一掃,關注我們

    主站蜘蛛池模板: 日本在线视频网址| 精品欧美一区二区在线观看| 巨大挺进她的花茎| 亚洲噜噜噜噜噜影院在线播放| 男男18gay| 日本精品少妇一区二区三区| 国产超爽人人爽人人做| 久久99精品久久久久婷婷| 最近中文字幕mv在线视频www| 免费人成网站在线观看不卡| 老司机亚洲精品影视www| 国产精品久久久久久影视| yy6080亚洲一级理论| 成都4片p高清视频| 亚洲乳大丰满中文字幕| 欧美黑人两根巨大挤入| 四虎comwww最新地址| 韩国电影禁止的爱善良的小子hd | 99热精品久久只有精品| 性一交一乱一伦一| 久久香蕉国产线看精品| 欧美一区二区影院| 人人妻人人澡人人爽人人精品浪潮| 精品蜜臀久久久久99网站| 国产日韩视频一区| 97精品国产91久久久久久久| 女人张开腿日出白浆视频| 久久一区二区三区99| 日韩一区二区三区精品| 亚洲国产成人久久综合一区| 欧美精品一区二区久久| 公和我乱做好爽添厨房中文字幕| 老师你好电影高清完整版在线观看 | 李丽珍蜜桃成熟时电影在线播放观看| 伊人五月天婷婷| 福利片一区二区| 国产FREEXXXX性麻豆| 色综合综合色综合色综合| 国产欧美在线观看一区二区 | 风间由美中出黑人| 国产精品国产三级在线专区|