illumina MiSeq基因測序試劑盒v3 150循環

產品名稱：MiSeq Reagent Kit v3 (150 cycles)基因測序試劑盒

產品貨號：MS-102-3001

產品說明：

大輸出: 15 Gb（600個循環數），3.8 Gb（150個循環數）

大Read: 多達2500萬

核酸類型: RNA, DNA

試劑類型: 雙端測序, 簇生成, 邊合成邊測序

技術: 測序

系統兼容性:研究模式下的MiSeqDx, 研究模式下的MiSeq FGx, MiSeq, MiSeq

產品介紹：

MiSeq試劑盒v3的通量在所有MiSeq試劑盒中居*。這款v3試劑盒保留了與v1和v2試劑盒相同的即用型預裝試劑盒，通過改良試劑，可提高簇密度和片段長度，并提高質量(Q)分值。

借助MiSeq試劑盒v3，研究人員可：

• 使單次運行的輸出翻倍

• 使用600次循環試劑盒，使片段長度長延伸至2 x 300堿基對

• 將片段數量增至2500萬個，以開創新的應用

更新系統軟件后，可釋放v3試劑盒的全部功能。

MiSeq v3試劑盒可使每個流動槽的輸出量翻倍。該試劑盒以600次循環格式提供，在任何Illumina測序系統上均可生成長片段長度。該試劑盒還提供150次循環格式，該格式支持計數應用。此外，我們將繼續供應所有MiSeq試劑盒v2配置。MiSeq試劑組件采用RFID編碼，并可巧妙地與MiSeq系統交互，以驗證與用戶定義的應用之間的兼容性。

產品名稱：illumina MiSeq基因測序試劑盒v3 150循環        產品貨號：MS-102-3001

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Illumina二代測序技術，邊合成邊測序（SBS），是廣泛采用的新一代測序（NGS）技術，負責產生世界上90％以上的測序數據。

Illumina的二代測序技術稱為邊合成邊測序(Sequencing-by-Synthesis,簡稱SBS)。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發及信號收集、剪切等3個步驟。這3個步驟可以重復，循環進行。每循環一次測定一個堿基。想測定多少個堿基（即讀長），就循環多少次。測序循環次數可以在軟件里設定。到底測序多長合適，要根據項目性質和需求來決定。大多數情況下，SR實驗（單端測序）測定1x50個堿基，PE實驗（雙端測序）測定2x150個堿基。

1 堿基延伸

Illumina測序試劑里所使用的dNTP特色，它們同時具有兩個修飾基團：一個熒光基團，一個可逆終止基團。A、G、C、T 4種堿基分別標記4種不同的熒光基團，它們在不同波長的激光激發下，能夠發射不同波長（即顏色）的熒光。熒光顏色與堿基種類一一對應，因此根據激發光的波長可以識別堿基。4種堿基的終止基團是一樣的。由于終止基團的存在，所有dNTP每次都只能延伸1個堿基，無論給予多長的反應時間。又由于該終止基團是可逆的，在熒光信號收集完畢之后，可以用剪切劑切除該終止基團，使堿基恢復自然的可延伸狀態，這時即可繼續進行下一輪循環，再測定一個堿基。

可逆終止基團技術是Illumina二代測序的一大特色。它與橋式PCR技術一起，構成了Illumina二代測序的兩大支柱，為穩定獲得高質量的測序數據打下了堅實的基礎。

2 信號采集

HiSeq系列測序儀具有紅綠兩根激光管，兩個濾色片。它們兩兩組合，可以形成4種不同的激發波長，正好分別用于激發A、G、C、T 4種堿基。

Cluster上所標記的熒光基團在激光激發下產生的信號，可以用相機拍攝或者掃描的方式收集信號。掃描技術速度比較快，被X10系列采用。由于FC面積比較大，而且上表面和下表面要分別拍照，所以拍照過程相當耗時。對于經典的HiSeq 2000來說，一次測序循環所產生的熒光信號，需要大約40分鐘的時間才能拍照收集完畢，時間比測序反應本身還要長。

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