Serochem PEI Prime AQ 液體轉(zhuǎn)染試劑

產(chǎn)品名稱：PEI Prime™? AQ 1 mg/mL Liquid Transfection Reagent

產(chǎn)品貨號：Prime-AQ100-100ML

產(chǎn)品說明：

PEI Prime™?是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑，旨在實現(xiàn)穩(wěn)定，低成本和可擴展的瞬時基因表達。PEI是用于HEK293和CHO懸浮培養(yǎng)物瞬時轉(zhuǎn)染的z受歡迎的試劑。PEI Prime™?是在哺乳動物表達系統(tǒng)中生產(chǎn)重組蛋白，抗體和病毒的選擇試劑。

PEI Prime™?AQ是一種含有純PEI Prime™?的1 mg / mL pH值調(diào)節(jié)和無菌過濾溶液。

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轉(zhuǎn)染前

傳代培養(yǎng)并擴增細胞，以獲得存活率大于95%且活細胞密度介于（1.5到2.0）x10之間的培養(yǎng)物

轉(zhuǎn)染時為6個細胞/mL。轉(zhuǎn)染1。在轉(zhuǎn)染前，確保存活率大于95%，活細胞密度為（1.5至2.0）x10

6個細胞/mL。2。將活細胞密度稀釋至1.05 x 10

每毫升6個細胞。反轉(zhuǎn)pDNA和PEI素數(shù)™ 1mg/mL試劑容器多次攪拌均勻。4將1μg pDNA轉(zhuǎn)移到干凈的小瓶中，每毫升培養(yǎng)液中轉(zhuǎn)移1μg pDNA。用新鮮培養(yǎng)基稀釋至40μg/mL。5將3μL PEI Prime轉(zhuǎn)移到干凈的小瓶中™ 每毫升要轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)物為1mg/mL。

使用培養(yǎng)基稀釋至120μg/mL。6。混合稀釋的pDNA和PEI Prime™. 倒轉(zhuǎn)幾次，讓蓋子在室溫下休息10分鐘。在使用前，輕輕地將封閉的容器倒置一次。7每95毫升要轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)物使用5毫升pDNA/PEI混合物。混合時逐漸加入培養(yǎng)基中。8在典型條件下培養(yǎng)細胞。

轉(zhuǎn)染后

如果使用飼料，助推器，補充劑，或增強劑，這些都可以安全地添加到任何時間后6小時轉(zhuǎn)染。如果需要，也可以在6小時后準(zhǔn)備亞培養(yǎng)。如果使用GFP對照，48小時后應(yīng)觀察到80%以上的轉(zhuǎn)染效率。對于優(yōu)化的程序，效率超過90%是合理的。監(jiān)測表達水平和收獲觀察穩(wěn)定滴度。對于典型的批處理過程，分泌的蛋白質(zhì)通常在轉(zhuǎn)染后5到7天達到大值

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